大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血?jiǎng)游锛S便、人類經(jīng)?;顒?dòng)的場所以及有糞便污染的地方,人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。大腸菌群是評價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。而檢測食品中大腸菌群的方法中,國內(nèi)采用的進(jìn)出口食品大腸菌群檢測方法主要有國家標(biāo)準(zhǔn),國家標(biāo)準(zhǔn)的三步九管法,即乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、分離培養(yǎng)、證實(shí)試驗(yàn)。
由于大腸菌群指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌,即:需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。因此大腸菌群的檢測一般都是按照它的定義進(jìn)行。
1.乳糖發(fā)酵試驗(yàn):樣品稀釋后,選擇三個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h,觀察是否產(chǎn)氣。
2.分離培養(yǎng):將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍(lán)瓊脂平板上,36±1℃培養(yǎng)18-24h,觀察菌落形態(tài)。
3.證實(shí)試驗(yàn):挑取平板上的可疑菌落,進(jìn)行革蘭氏染色觀察。同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h,觀察產(chǎn)氣情況。
在乳糖發(fā)酵試驗(yàn)工作中,經(jīng)??梢钥吹皆诎l(fā)酵倒管內(nèi)極微少的氣泡(有時(shí)比小米粒還小),有時(shí)可以遇到在初發(fā)酵時(shí)產(chǎn)酸或沿管壁有緩緩上浮的小氣泡。實(shí)驗(yàn)表明大腸菌群的產(chǎn)氣量,多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體,少者可以產(chǎn)生比小米粒還小的氣泡。
在試驗(yàn)過程中,會(huì)用到高壓滅菌器來進(jìn)行滅菌,九管法滅菌時(shí),大腸菌在高溫下會(huì)產(chǎn)生氣泡,如果用的是CT90B高壓滅菌器,可以通過進(jìn)入界面菜單,調(diào)整在升溫過程中的排氣時(shí)間,可以有效的排走殘留在培養(yǎng)基中的氣泡。
高壓滅菌器擁有微電腦芯片智能控制系統(tǒng),實(shí)時(shí)監(jiān)測滅菌腔內(nèi)的溫度、壓力,只有在安全的溫度和壓力下才能開啟滅菌腔蓋,確保使用人員的安全。同時(shí)實(shí)現(xiàn)了滅菌過程的全自動(dòng)控制,而且可以便捷地進(jìn)行維護(hù)、查詢、校驗(yàn)、記錄,及將來的擴(kuò)展升級。能夠?qū)崟r(shí)打印滅菌溫度、壓力、時(shí)間等各種狀態(tài)下數(shù)據(jù),進(jìn)行滅菌狀態(tài)監(jiān)測。并且滅菌結(jié)束后自動(dòng)干燥,干燥徹底,達(dá)到CE效果??梢蕴峁?.2μm空氣過濾器,滅菌結(jié)束,讓外部空氣經(jīng)過濾后進(jìn)入腔體,實(shí)現(xiàn)無菌狀態(tài)下快速烘干。采用自動(dòng)進(jìn)水(僅CT-B CT-C型號提供),通過水箱,可對腔體自動(dòng)補(bǔ)水,免除頻繁加水的不便,配備的水位傳感器,可在缺水時(shí)自動(dòng)停機(jī)并報(bào)警。系統(tǒng)自動(dòng)監(jiān)測冷空氣排放情況,確保純蒸汽的滅菌環(huán)境,保證最佳滅菌效果。